细胞工程之动物细胞工程（五）

(108).单克隆抗体的应用：

<1>.做诊断试剂：如用抗人容貌膜促性腺激素单克隆抗体做成的早早孕诊断试剂盒、利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中成像技术定位诊断肿瘤等。

<2>.用于治疗疾病：将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合形成抗体-药物偶联物（ADC）使药物定向作用于肿瘤细胞。

(109).抗体-药物偶联物的原理使单克隆抗体与肿瘤细胞表面的特定抗原的专一性结合。

(110).动物细胞核移植技术：将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。

(111).哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞细胞核移植。

(112).动物体细胞细胞核移植难度明显高于胚胎细胞核移植的原因：动物胚胎分化程度低，表示全能性相对容易；动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。

(113).减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体-染色体复合物，“去核”就是除去该复合物。

(114).非人灵长类的体细胞核移植非常困难的主要原因：供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态，胚胎发育率低。

(115).体细胞核移植过程：

<1>.从屠宰场中收集动物卵巢采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期。

<2>.从供体某部位取体细胞进行培养。

<3>.通过显微操作将卵母细胞去核（需穿过细胞膜）后将供体的体细胞注入其中（只穿过透明带）。

<4>.通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚。

<5>.用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，形成早期胚胎。

<6>.将胚胎移入受体体内，生出与供体遗传物质基本相同的幼体。

(116).受体细胞选择MⅡ时期的卵细胞的原因：体积大（易于操作）、卵黄多（营养物质丰富）、具备受精能力和细胞质中含有能刺激融合后的重组细胞进行分裂、分化形成重构胚的物质。

(117).供体细胞选用传代10代以内的细胞来保证工体细胞正常的遗传基础。

(118).克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系，但也不可能与供体动物完全一致。

(119).把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中的目的是减少对细胞核的损伤。

(120).核移植过程中可用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第一极体一并吸出。

(121).重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力。

(122).动物细胞核移植技术中最常用的去核方法是显微操作法，除此之外还有梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法（在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性）。