生物实验报告

时间：2025-09-06 07:21:16 实验报告

生物实验报告15篇[集合]

　　随着个人的文明素养不断提升，越来越多人会去使用报告，我们在写报告的时候要避免篇幅过长。其实写报告并没有想象中那么难，以下是小编为大家收集的生物实验报告，希望对大家有所帮助。

生物实验报告15篇[集合]

生物实验报告1

　　为了加强我院医院病原微生物实验室的生物安全管理工作，确保实现医院的安全目标，我院检验科根据xxxx省《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关规定，对医院实验室的安全管理工作进行了自查。我们还针对涉及病原微生物菌(毒)种及样本的人员进行了培训，提高他们的生物安全意识，并确保他们掌握必要的生物安全知识。

　　一、实验室生物安全管理工作、各项规章制度的运行情况

　　医院检验科注重学习和遵守《病原微生物实验室生物安全管理条例》，并定期对生物安全各项规章制度的运行情况进行检查和整改。实验室严格遵守国家标准、实验室技术规范和操作规程，并指派专人监督检查其落实情况。同时，详细记录检查情况，并定期召开会议讨论发现的问题，并及时纠正。

　　二、病原微生物菌(毒)种的管理及运输

　　由于目前我院的相关条件存在限制，暂时无法开展病原微生物实验室生物的检查。为了满足通知要求，我们积极组织相关人员学习了以下内容：严格管理病原微生物实验室菌(毒)种的登记制度，一旦收到菌(毒)种后立即进行编号登记，并详细记录菌(毒)种的名称、来源、特性、用途、批号、传代日期和数量。在菌(毒)种的管理过程中，包括安全保卫制度、安全保卫措施和保管过程中的传代、分发和使用，都需要及时进行登记，同时定期核对库存数量。在销毁菌(毒)种时，还需进行灭菌指示标志和灭菌效果的登记，并做好销毁过程的记录。

　　三、实验室生物安全突发事件的处理工作

　　在本次自我检查中，我们实验室对之前制定的应急指挥和处置体系进行了修订，以更好地满足实际工作的需求。

　　当遭遇自然灾害（例如地震、水灾等）或设施故障时，我们制定了针对可能出现的紧急情况的处理原则和应对措施。

　　同时规范了菌(毒)种外溢在台面、地面和其他表面的'的处理原则、皮肤刺伤(破损)的处理原则、离心管发生破裂的处理原则并建立了意外事故报告制度。

　　我们在实验室的醒目位置贴出了一份联系电话列表，方便大家随时获取相关部门的联系方式。这份列表包括实验负责人、实验室工作人员、消防部门、医院、公安机关、工程技术人员、以及水、电气维修部门的电话号码。

　　四、提高意识，加强学习

　　组织检验人员对《病原微生物实验室生物安全管理条例》进行全面系统的学习，同时加强了实验室的准入制度的管理，标明实验室类型、负责人及其联络方式。加强了个人安全防护。

　　经过此次对微生物实验室生物安全管理工作的自查，我们全体检验人员对该工作的重要性有了更深刻的认识。为加强管理，确保实验室工作的安全，我们采取了有效措施。

生物实验报告2

　　一、实验目的

　　1.初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。

　　2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。

　　二、实验原理

　　淀粉和蔗糖都是非还原糖，它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖，还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的'氧化亚铜沉淀。

　　用淀粉酶分别催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化这两种化学反应。

　　三、材料用具

　　滴管、试管、火柴、试管架、温度计、三脚架、石棉网、酒精灯、烧杯、质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液、质量分数为3%的可溶性淀粉溶液、质量分数为3%的蔗糖溶液、斐林试剂

　　四、实验过程

　　（见书Ｐ47）

　　五、讨论

　　1.制备的可溶性淀粉溶液,必须完全冷却后才能使用。为什么？

　　２.两支试管保温时,为什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?

　　3.如果2号试管也产生了砖红色沉淀,可能是由哪些原因造成的？

生物实验报告3

　　一、实验目的

　　初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

　　二、实验原理

　　1、还原糖的鉴定原理

　　生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团（游离醛基或游离酮基），因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。

　　斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05 g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下：

　　CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O

　　用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。

　　2、蛋白质的鉴定原理

　　鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01 g/mL(B)的`硫酸铜溶液。在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。

　　3、脂肪的鉴定原理

　　脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色

　　三、实验过程（见书P18）

　　四、实验用品（见书P18）

　　五、注意

　　1、关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。

　　2、斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后方可使用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。

　　3、蛋白质的鉴定中先加双缩脲A，再加双缩脲B

　　六、讨论

　　鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的根据是什么？

生物实验报告4

　　医学生物学是中医院校的基础课程，是一门实践性很强的学科。实验教学是医学生物学教学过程中重要的组成部分，实验教学效果的好坏直接影响课堂教学的效果和学生对医学生物学的兴趣。高年制的医学生是各医学院校重点培养的高层次医学人才，因此，对他们的要求远远高于五年制学生，除了要求他们掌握全面扎实的专业知识外，还要求他们具有较高的科研素质、创新能力和实践能力，进而全面提高高年制学生的综合素质，培养学生分析问题、解决问题的能力。基于此，实验教学改革成为我们教学的重点。笔者综合分析目前我室的生物学实验教学过程，除了基本的医学生物学实验外，还开设了现代生物学实验技术课，这门实验课主要包括细胞培养、细胞传代和染色体显带等实验；在进行观察体外培养细胞的基本形态这个实验时，对该实验进行几个方面的改革，主要包括对实验教学方法、实验内容设计和实验具体操作进行改进，经调查，改革后实验教学效果较好。

　　一、实验教学方法改革

　　观察体外培养细胞的基本形态这个生物学实验的目的有两个：

　　一是掌握倒置显微镜的使用方法；

　　二是让学生了解细胞的基本形态结构和体外培养细胞的生长状况。

　　这样，有助于学生理解细胞是生命有机体的基本结构单位。针对这个实验目的，我们采用多媒体教学和国内外文献教学相结合，从体外培养细胞的形态特征类型开始讲解，结合不同细胞的图片，逐步讲解。同时，结合实物演示（培养瓶中装有不同时间的培养细胞）给学生讲解体外培养细胞的生长状况和细胞培养中的污染情况，使学生对这个实验先有感官认识，然后让学生自己设计实验。

　　二、实验内容设计

　　在实验内容设计过程中，我们首先对实验室的实验条件和经费进行考虑，然后结合高年制学生的实际条件进行实验设计。我校高年制的学生在进行现代生物学实验技术学习时，已经完成了基本的医学生物学实验，如显微镜的观察、蟾蜍的解剖等基本实验，所以，在进行现代生物学实验技术时已经具备了一定的知识水平。高年制的学生分两组进行这个实验，每组为21人，结合我室的实验条件，倒置显微镜只有一台，要完成这个实验而且效果要好必须进行以下的实验设计：

　　（1）细胞的准备：培养瓶细胞的准备和24孔板细胞的准备。

　　（2）盖玻片的无菌准备。

　　（3）细胞固定试剂的选择。

　　（4）显微互动实验室进行固定细胞的观察；倒置显微镜进行培养瓶细胞的观察。

　　（5）进行实验结果的分析、讨论。

　　三、具体操作步骤的改进

　　实验内容设计好以后，进行具体的操作步骤：

　　（1）将21个学生分为7组，每3人1组。

　　（2）以往实验是利用培养瓶培养细胞，但是只有一台倒置显微镜，所以改为24孔板内放置盖玻片培养细胞。

　　（3）每组进行培养细胞前准备。首先各组进行盖玻片的无菌处理，然后将无菌的`盖玻片放入24孔板内。

　　（4）各组进行24孔板内细胞接种培养，即爬片。

　　（5）将有细胞的盖玻片取出，各组进行固定。

　　（6）第一组、第二组采用丙酮固定；第三组、第四组采用95%乙醇固定；第五组、第六组采用甲醛固定；第七组采用甲醇冰醋酸固定。

　　（7）在显微互动实验室进行细胞形态的观察。

　　（8）交叉进行倒置显微镜下观察培养瓶内的细胞。实验完成后进行实验报告的书写，内容包括实验原理、实验目的、实验设计及实验结果的讨论等。学生将固定的细胞和未固定细胞的形态观察进行讨论分析，讨论的过程较热烈，有的学生提出的问题特别有意义，这样既可以让每个学生参与实验，同时，又增强了同学提出问题、解决问题的能力。

　　针对观察体外培养细胞的基本形态这个实验，我们进行了以上这几个方面的改进，使学生在教学过程中的各个环节都主动参与并不断地提出新的问题。在这个过程中，学生得到锻炼的同时，教师也在教学中得到了学习，扩展了知识面。实验教学是树立学生实践观念，培养分析、解决实际问题能力，启迪学生创新思维，提高学生综合素质的重要环节。所以，在实验教学过程中，我们要不断地进行探索和改革，这样更有利于培养学生的新能力和科研素质。

生物实验报告5

　　一、实验目的

　　1.初步学会探索酶的催化效率的方法。

　　2.探索过氧化氢酶和Fe3+催化效率的高低。

　　二、实验原理

　　新鲜的'猪肝中含有过氧化氢酶，Fe3+是一种无机催化剂，它们都可以催化过氧化氢分解

　　成水和氧

　　三、材料用具

　　质量分数为20%的新鲜猪肝浆、滴管、试管、火柴、试管架、质量分数为3.5%的氯化铁溶液、体积分数为3%的过氧化氢溶液。

　　四、实验过程（见书Ｐ30）

　　五、讨论

　　实验中选择新鲜的猪肝是因为新鲜的猪肝中的酶活性较高，能够更有效地催化反应。另外，新鲜的猪肝也能保证实验结果的可靠性和准确性。在滴入猪肝研磨液和氯化铁溶液时，不可以公用一个吸管。这是因为两种液体中可能含有不同的物质，通过公用一个吸管会导致交叉污染，影响实验结果的准确性和可靠性。

生物实验报告6

　　年级班实验人：组次：试验时间：

　　一、探究目的

　　1、通过观察酒精或烟草浸出液对水蚤心率的影响，知道酗酒和吸烟对人体健康的.危害。

　　2、知道生活方式和饮食习惯对人类健康的影响。

　　二、探究步骤

　　1、发现并提出问题：______________________________________ 。

　　2、作出假设：___________________________________________________ 。

　　3、制定计划：

　　4、实施计划：认真记录和分析探究的过程和结果和。

　　5、得出结论：_________________________________________________________ 。

　　6、表达交流。

　　三、讨论

　　1、酒精或烟草浸出液对水蚤心率有什么影响？怎样解释这种现象？

　　2、酗酒和吸烟对人体健康可能有哪些危害？

　　3、影响人们健康的因素有哪些？

生物实验报告7

　　一、实验目的

　　1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。

　　2、比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系

　　二、实验原理

　　光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液（脂溶性强的有机溶剂）中的'溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。

　　三、材料用具

　　取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液（20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合）、二氧化硅、碳酸钙。

　　四、实验过程（见书P54）

　　1、提取色素：xxxx。

　　2、制备滤纸条：xxxx。

　　3、色素分离，纸层析法。（不要让滤液细线触及层析液）

　　4、观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。

　　五、讨论

　　1、滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？

　　2、提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？

　　六、结论

　　略

生物实验报告8

　　实验名称：

　　用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动

　　一、实验目的

　　1.初步掌握高倍显微镜的使用方法。

　　2.观察高等植物的叶绿体在细胞质基质中的形态和分布

　　二、实验原理

　　高等植物的叶绿体呈椭球状,在不同的光照条件下,叶绿体可以运动,改变椭球体的方向,这样既能接受较多的光照,又不至于被强光灼伤。在强光下,叶绿体以其椭球体的侧面朝向光源;在弱光下,叶绿体以其椭球体的正面朝向光源。因此,在不同光照条件下采集的葫芦藓,其小叶内叶绿体椭球体的形状不完全一样。活细胞中的`细胞质处于不断的流动状态，观察细胞质的流动，可以用细胞质基质中的叶绿体的运动做为标志。

　　三、材料用具

　　藓类的叶，新鲜的黑藻，显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，刀片，培养皿，铅笔

　　四、实验过程（见书Ｐ30）

　　1．制作藓类叶片的临时装片

　　2．用显微镜观察叶绿体

　　3．制作黑藻叶片临时装片

　　4．用显微镜观察细胞质流动

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　　五、讨论

　　1．细胞质基质中的叶绿体是否静止不动，为什么？

　　2．叶绿体的形态和分布与叶绿体的功能有什么关系？

　　3．植物细胞的细胞质处于不断的流动状态，这对于活细胞完成生命活动有什么意义？

　　4．用铅笔画一个叶片细胞，标出叶绿体的大致流动方向。

生物实验报告9

　　一、实验目的

　　1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。

　　2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。

　　二、实验原理

　　当细胞液的'浓度低于外界溶液的浓度时，水分会通过原生质层进入外界溶液中，导致细胞壁和原生质层发生收缩。因为原生质层的收缩性大于细胞壁，随着细胞不断失水，原生质层逐渐与细胞壁分离，即发生了质壁分离。相反，当细胞液的浓度高于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分会通过原生质层进入细胞液中，原生质层会逐渐恢复到原来的状态，从而使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

　　三、材料用具

　　紫色洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、吸水纸、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

　　四、实验过程（见书Ｐ60）

　　五、讨论

　　1. 如果把洋葱表皮细胞浸泡在与细胞液等渗的蔗糖溶液中，这些细胞会发生质壁分离现象。

　　2．当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离现象？为什么？

　　3.绘制一组模式图，描述一个细胞在正常状态下，经过处理后的变化。首先将细胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中处理，然后再经过清水处理。

生物实验报告10

　　质粒DNA的提取、纯化及检测

　　姓名：XXX学号：2011001400XX年级：20xx级生物基地班实验日期：20xx年9月16日—30日组别：6组同组者：XX

　　一、【实验目的】

　　1、掌握碱变性提取法提取大肠杆菌中质粒DNA的原理和方法。

　　2、学习并掌握凝胶电泳进行DNA的分离纯化的实验原理。

　　3、学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。

　　4、学习并掌握凝胶中DNA的分离纯化方法。

　　二、【实验原理】

　　1、质粒DNA的制备方法

　　质粒（Plasmid）是独立存在于染色体外、能自主复制并能稳定遗传的一种环状双链DNA分子，分布于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中，但在细菌细胞中含量最多。细菌质粒大小介于1～200Kb之间，是应用最多的质粒类群，在细菌细胞内它们利用宿主细胞的复制机构合成质粒自身的DNA。

　　质粒DNA的制备包括3个步骤：①培养细菌，使质粒DNA大量扩增；②收集和裂解细菌；③分离和纯化质粒DNA。主要方法包括：碱裂解法：0。2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于质粒大量提取。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途进行选择。本实验选择碱裂解法提取质粒DNA。

　　2、质粒DNA的提取——碱变性提取法

　　在细菌细胞中，染色体DNA和质粒DNA均被释放出来，但是两者变性与复性所依赖的溶pH值不同。在pH值高达12。0的碱性溶液中，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性；共价闭合环状质粒DNA的大部分氢键断裂，但两条互补链不完全分离。因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。当用pH值4。6的KAc（NaAc）高盐溶液调节碱性溶液至中性时，变性的质粒DNA可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中；但染色体DNA不能复性，而是与不稳定的大分子RNA、蛋白质—SDS复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心，与复性的溶于溶液的质粒DNA分离。溶于上清液的质粒DNA，可用无水乙醇和盐溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性质类似，乙醇沉淀

　　DNA的同时，也伴随着RNA沉淀，可利用RNaseA将RNA降解。质粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通过酚/氯仿抽提除去，最后获得纯度较高的质粒DNA。

　　3、凝胶电泳进行DNA分离纯化

　　电泳（electrophoresis）是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极方向移动的现象。各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质，它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，移动的速度可因电离子的大小形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异，就可以区别各种大小不同的分子。因而，凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化DNA的片段，是分子生物学的核心技术之一。

　　凝胶电泳技术操作简单而迅速，分辨率高，分辨范围广。此外，凝胶中DNA的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接观察到，甚至含量少至20pg的双链DNA在紫外激发下也能直接检测到。需要的话，这些分离的DNA条带可以从凝胶中回收，用于各种各样目的的实验。

　　分子生物学中，常用的两种凝胶为琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶。这两种凝胶能灌制成各种形状、大小和孔径，也能以许多不同的构型和方位进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高，使用于较小分子核酸（5—500bp）的分离和蛋白质电泳。它的分辨率非常高，长度上相差1bp或质量上相差0。1%的DNA都可以彼此分离，这也是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行DNA序列分析的分子基础。虽然它能很快地进行电泳，并能容纳较大的DNA上样量，但是与琼脂糖凝胶相比，在制备和操作上繁琐。琼脂糖是从海藻中提取的长链状多聚物，由β—D—吡喃半乳糖与3，6—脱水—L—吡喃半乳糖组成，相对分子质量为104—105。琼脂糖加热至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液体，浇在模版上冷却后形成凝胶，其凝固点为40—45℃。琼脂糖凝胶相对于聚丙烯酰胺凝胶分辨率低，但它的分离范围更大（50至百万bp），小片段DNA（50—20000bp）最适合在恒定轻度和方向的'电场中水平方向的琼脂糖凝胶内电泳分离。琼脂糖凝胶电泳易于操作，适用于核酸电泳，测定DNA的相对分子质量，分离经限制酶水解的DNA的片段，进一步纯化DNA等。

　　琼脂糖凝胶电泳是一种常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而带有负电荷，在电场中向正极移动。DNA在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率主要取决于6个因素：样品DNA分子的大小、DNA分子的构象、琼脂糖浓度、电泳所用电场、缓冲液和温度。

　　三、【实验材料】

　　1、实验仪器

　　培养皿、接种环、三角瓶、酒精灯、恒温振荡培养箱、50ml离心管、1。5ml塑料离心管（Eppendorf管）、高速离心机、漩涡振荡器、微量移液器、不同型号枪头、天平、制胶槽、梳子、电泳仪、吸管、量筒、微波炉、灭菌锅、恒温水浴锅、试剂瓶、卫生纸和记号笔、手套等。

　　2、实验试剂

　　LB培养基，抗生素Ap（氨苄青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE缓冲液，饱和酚，氯仿/异戊醇混合液，酚/氯仿/异戊醇（PCI）混合液，预冷无水乙醇，TAE电泳缓冲液（10×），上样缓冲液（6×），琼脂糖，溴化乙锭（EB），DNA相对分子质量标准物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5。2的醋酸钠。

　　四、【实验步骤】

　　1、准备实验

　　配制LB液体培养基，分装到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固体培养基；准备1000ul、200ul、10ul移液枪尖各一盒，1。5ml离心管若干于500ml三角瓶中，50ml离心管2个，将上述物品包好连同配好的培养基一同灭菌。

　　2、菌体培养

　　在含有Ap的LB平板上挑取一环携带有质粒pUC19的E。coli DH5单菌落，接种于20mlLB液体培养基中进行37℃振荡过夜培养，培养基中加Ap100ul

　　（100ug/ml），质粒pUC19具有Ap抗性基因，使得带有pUC19的质粒得以生长。过夜培养后菌体量大，杂质较多，然后用移液枪吸取过夜培养物2ml转接于50mlLB液体培养基中，培养基中加入Ap250ul，37℃振荡培养4—6h至对数生长期后期，生长速率快，代谢旺盛，酶系活跃，杂质少，适合提取质粒。

　　3、质粒提取

　　（1）称量空的50ml离心管的重量为14。331g，然后将三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒满，液面距管口约1cm，7000rpm离心5分钟后弃去上清液，收集菌体细胞。

　　（2）向离心管中悬滴加入5ml冰预冷的溶液Ⅰ打散菌体洗涤，用漩涡振荡器使之充分悬浮后用枪尖吹吸混匀，同步骤（1）离心，弃去上清，将离心管倒置于吸水纸上，使上清液全部流尽干燥，然后称重得14。437g，则菌体质量为106mg。

　　（3）洗涤后每100mg菌体应加入冰预冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌体按100mg菌体处理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混匀，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使

　　溶液密度增加，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部；维持渗透压，防止细胞提前破裂，防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生长。Tris—Cl溶液提供适当的pH。

　　（4）按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（与溶液Ⅰ对应），轻加轻摇，冰浴5min。溶液变清亮透明粘稠如蛋清状。溶液Ⅱ中的NaOH使细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的相变化导致细胞溶解。同时，强碱性使染色体DNA、质粒DNA和蛋白质变性；SDS为下一步沉淀做铺垫。

　　（5）按比例加入冰预冷的溶液Ⅲ1。5ml（与溶液Ⅰ、Ⅱ对应），轻加轻摇，冰浴10min。溶液出现白色絮状沉淀。沉淀为蛋白质SDS复合物、细胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因为长时间的碱性条件会打断基因组DNA，只要是50－100 kb大小的片断，就不能再被PDS共沉淀。同时变性的质粒DNA复性。反应形成的高盐环境进一步加速了沉淀。

　　（6）12000rpm离心15min，白色沉淀聚集在离心管一侧，用移液枪将上清液转移到另一洁净的离心管中。然后向上清液中加入1/10体积的3MNaAc混匀，加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀。

　　（7）以12000rpm离心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，轻轻地覆盖沉淀，不打散沉淀，洗涤一次。

　　（8）以12000rpm离心5min，离心管底部DNA沉淀所在面应与收集沉淀面一致。去掉上清液，将离心管上沉淀部位做好标记，将离心管倒置于吸水纸上，干燥5min。粗提取的质粒呈浅黄色，随着水分的减少质粒变为无色。所以为了完全溶解质粒，要在离心管上标记质粒所在位置。

　　（9）将DNA沉淀溶于1mlTE缓冲液中，移液枪吹吸助溶，然后将溶解液转移到一个Eppendorf管中。TE是pH缓冲液，为DNA提供稳定的生理状态，呈弱碱性，有利于保护碱基对。同时含有EDTA是二价阳离子的螯合剂，抑制DNA酶作用。

　　4、质粒纯化

　　（1）Eppendorf管中加入RNase A（纯浓度＞50ug/ml），37℃保温0。5—1h

　　（2）将上述的溶液平均分配到2个1。5ml的微量离心管中，每管0。5ml，分别加入与溶液等体积的（500ul）Tris饱和苯酚溶液，振荡混匀，7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的Eppendorf管中。苯酚是经Tris饱和后的，显黄色。苯

　　酚加入后，溶液分层，苯酚向下，下层呈浅黄色，上层溶液无色，在中间产生大量白色沉淀，此为变性后的蛋白质。

　　（3）加入等体积的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到到另一洁净的Eppendorf管中。苯酚是强的蛋白变性剂，但是苯酚留在质粒溶液中会影响DNA的酶切，它本身易被氧化，会损伤质粒。氯仿也是蛋白变性剂，但是比酚弱，且能溶解质粒中的脂类，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫，有利于分层更明显。此时溶液中已看不到明显的白色沉淀，但仍有蛋白质的存在。

　　（4）加入等体积的氯仿溶液，振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的Eppendorf管中，得上清液400ul。

　　（5）向上清液中加入1/10体积的NaAc混匀，再加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。

　　（6）以12000rpm，离心15min，弃去上清液，得到DNA沉淀，为白色。

　　（7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗涤。然后以12000rpm离心5min，离心管底部DNA沉淀所在面应与收集沉淀面一致。

　　（8）去掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，室温干燥。用50ulTE溶解于1管中。

　　5、质粒检测

　　（1）称取0。4g的琼脂糖，置于一锥形瓶中，在三角瓶上标好液面位置，加入40ml的1×TAE电泳缓冲液，再加入5—10ml重蒸水，以补充在溶胶过程中损失的水分。然后置微波炉加热至完全溶化，溶液透明。冷却至50℃左右，倒入制板槽制板。

　　（2）待胶凝固后，小心拔起梳子，使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入1×TAE 电泳缓冲液，至液面覆盖过胶面2—3cm。取1μl加电泳载样液和3μl质粒样品于小纸片上，用移液枪混匀。

　　（3）电泳1h，观察溴酚兰的带（蓝色）的移动。

　　（4）把胶槽取出，小心滑出胶块，放进EB溶液中进行染色，完全浸泡约5min。

　　（5）凝胶成像仪观察。

　　五、【注意事项】

　　（1）滴加溶液II时，要逐滴加入，且要轻加轻摇溶液使之混匀，整体动作要快，因为强碱在溶液中停留时间不能过长，否则会破坏质粒DNA。

　　（2）加入溶液III后，生成了大量的絮状沉淀，溶液III中和强碱使质粒复性，不可剧烈震荡，防止染色体DNA断裂，应该上下颠倒离心管，使其混匀。

生物实验报告11

　　骨髓检验报告的书写是检验专业学生《血液学检验》课程中非常重要的内容之一，在常见贫血、白血病等血液病的诊断、协助诊断和疗效观察过程中，临床医师需要反复抽取患者的骨髓送血液科进行骨髓检查，每次检查后检验医师都要填写骨髓检验报告，供临床医师诊断疾病，观察疗效，直到患者病情完全缓解出院为止。因此，骨髓检验报告单的填写质量要求非常高，一份良好的骨髓检验报告单是骨髓细胞特征的全部再现，是检验医师骨髓检验技术和对临床资料综合分析能力的高度体现，检验医师不仅需要较强的识别骨髓细胞形态的能力，写一份合格的骨髓检验报告更重要。学生在学习过程中，对骨髓检验报告的书写常感到非常困难，为了上好这一课，笔者在多年的教学过程中，积极探索，结合学生实际与临床实际，对骨髓检验报告单的书写探索出了一套较好的教学方法，能使学生在较短的教学时间里写好一份骨髓检验报告，并让学生通过骨髓检验报告单的书写，全面熟悉、掌握贫血及白血病等常见血液病的血象及骨髓象特征，学会分析骨髓象，掌握相关骨髓检验技术，并正确为常见血液病下诊断。现将教学方法交流如下。

　　1.总结出一套骨髓检验报告基本书写模板，要求学生根据所检验的血液病的血象和骨髓象特征，按照模板认真填写

　　根据教材及临床实际，骨髓检验报告单的书写具有一定规律，但对初学者学生来说，要写好一份骨髓检验报告单确是一件非常困难的事，为了让学生在课时数少的情况下尽快掌握书写技巧，笔者为学生总结出了一套骨髓检验报告单书写基本模板，供学生参考，要求学生按照模板要求认真分析骨髓象，填写不缺项。这样做可以帮助学生理清思路，有计划、有条理地去分析骨髓象，书写报告单，减少了学生走弯路的时间。

　　1.1一般情况下骨髓象书写基本格式

　　①取材满意、涂片染色良好。

　　②骨髓有核细胞增生程度，粒红比值。

　　③粒系细胞增生程度，所占比值，以哪1-2阶段的细胞为主，各阶段细胞形态特征。

　　④红系细胞增生程度，所占比值，以哪1-2阶段的细胞为主，各阶段细胞形态特征。成熟红细胞形态特点。

　　⑤淋巴细胞及单核细胞比值、形态特征。

　　⑥全片见到巨核细胞多少个，以哪1-2阶段细胞为主，各阶段细胞形态特点。血小板分布及形态特点。

　　⑦全片未见寄生虫及其他异常细胞。

　　1.2常见贫血的骨髓象书写格式

　　在报告基本格式的基础上，把“4、与3、”对换位置，并要求学生要特别重点描述幼红细胞形态改变，以及成熟红细胞形态改变特点，因为不同的贫血，幼红细胞和成熟红细胞形态都会出现不同的形态改变，这样有助于贫血的分类和诊断。

　　1.3常见白血病的骨髓象书写格式

　　在报告基本格式的基础上，根据白血病发生在哪个系，就将哪个系的白血病细胞改变情况放在第3条描写，第2条不用填写粒红比值，未发生白血病改变的其他系细胞受抑制。

　　例如，急性淋巴细胞白血病L1书写格式：

　　①取材满意、涂片染色良好。

　　②骨髓有核细胞增生极度活跃。

　　③淋巴系细胞增生极度活跃，以原始淋巴细胞为主，占65%，幼稚淋巴细胞占29%，原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞以小细胞为主，大小较一致，核型规则，细胞核染色质较粗，核仁1-2个，不太清楚，胞浆量少，退化细胞较多。

　　④红系及粒系细胞受抑制，细胞形态基本正常。

　　⑤全片见巨核细胞2个，血小板少见，形态基本正常。

　　⑥全片未见寄生虫及其他异常细胞。

　　2.认真批改学生写的骨髓检验报告，找出问题，并及时在课堂上讲评，指导学生及时纠正错误

　　一般情况下，就算是照着模板写报告，学生前几次所写的报告都会出现不少问题。如，常有一些学生在报告中没有描述成熟红细胞形态特点，血小板分布和形态，出现粒红比值计算结果错误，忽略第一条“取材满意、涂片染色良好”及最后一条“全片未见寄生虫及其他异常细胞”等。也会出现不知怎样描述异常幼红细胞形态特点和白血病细胞形态特点，难下诊断等问题。还会在报告文字描述中用一些口水话，写错字、涂改字等。因此，每次学生交来的骨髓检验报告，笔者都会认真批改，在报告上注明错误的地方，并把正确的答案也批在报告上。然后统计分析学生出现哪些问题，某种问题出现人数有多少等情况。在下一次的课堂上，笔者就会针对学生出现的问题一一讲评，对学生每一次的进步都给予表扬。而且，每一次讲评都做到讲深讲透。

　　2.1骨髓检验报告中学生问题分析：

　　2.1.1不填取材满意、涂片染色良好

　　这一条有的学生会不写，他们认为没必要，但笔者要求一定要写。因为这一条包含的意义在于检验医师应该首先检查临床医师送检的骨髓片是否是成功抽取的骨髓涂片，如果取材满意，才有对骨髓象进行分析的价值。随后检验医师对骨髓涂片要进行瑞特染色，染色良好的.片子，骨髓细胞形态才好识别，才能有效分类骨髓细胞。因此，这一条的书写，可提醒学生要重视以上问题，对初学者来说是必须的。

　　2.1.2粒红比值算错

　　粒红比值是指检验医师所分类的骨髓细胞中全部粒系细胞数除以全部红系细胞数所得的值，这个值可以反映骨髓中粒系细胞和红系细胞所占比例是否在正常范围，表达方式以正常骨髓粒红比值为例，粒：红=2-4：1，有的同学会写成粒红比值1：2-4，这样一来，意义就完全不同了，一般是学生粗心大意和理解错误的结果，必须给予纠正，并说明道理。

　　2.1.3漏填成熟红细胞形态特点

　　成熟红细胞形态变化，在常见贫血的诊断中具有较大意义，不同的贫血，成熟红细胞形态会发生不同的改变。如巨幼细胞性贫血，骨髓象中成熟红细胞大小不均，以大细胞为主，红细胞中央淡染区不明显。因此，要求学生一定要重视成熟红细胞形态描述。

　　2.1.4漏填血小板分布及形态特点

　　血小板数量的减少、形态的异常，会影响机体止血和凝血的功能，导致机体组织、器官、粘膜容易出血，或出血不止。如再生障碍性贫血和常见白血病等患者的骨髓中一般会出现不同程度的血小板减少，或形态异常，检验医师对骨髓中血小板分布情况和形态改变的描述，可为临床医师提供患者出血原因，出血程度分析等参考依据，因此也很重要，要求学生不能省略或遗漏。

　　2.1.5忽略全片未见寄生虫及其他异常细胞

　　有些寄生虫病如疟疾、弓形虫病等，在骨髓中可发现相应的虫体或寄生虫滋养体等，如果是血液病合并寄生虫感染患者，发现寄生虫就可为临床医师提供有价值的诊断依据。

　　有些血液病可在骨髓中发现特殊异常细胞及病理细胞，如骨髓癌转移、戈谢病、尼曼匹克病等，如在骨髓中发现异常的癌细胞、特殊形态的戈谢细胞及尼曼匹克细胞，对相应的疾病有绝对的诊断意义。因此，写这一条，更重要的是提醒大家在观察分析骨髓象时要同时注意观察骨髓中是否存在寄生虫，是否存在特殊异常细胞，不管有没有，都要给临床医师一个明确的回答。

　　2.1.6异常幼红细胞形态特点和白血病细胞形态特点描述不清

　　出现这个问题主要有两个方面的原因：一是学生识别细胞能力不足，二是没有掌握相关血液病的骨髓象特征，看不出特点，抓不住重点，不知该怎样描述。针对这个问题，笔者便结合相应血液病骨髓象进行认真分析，如典型的缺铁性贫血骨髓象幼红细胞改变特点为，幼红细胞胞体小，胞浆量少，胞浆边缘不整齐、嗜碱性，中晚幼红细胞核染色质浓缩、深染。同时加强骨髓细胞形态学改变投影演示、版图描绘、显微镜下指导，提高学生识别骨髓细胞能力及对血液病骨髓象特征掌握程度。

　　2.1.7正确下诊断困难

　　每一份骨髓检验报告都需要下一个诊断意见，为临床医师提出细胞学诊断意见或可供临床参考的意见。骨髓检查诊断疾病的性质一般分为明确诊断、符合诊断、提示性诊断和排出性诊断等，不同的血液病应该以不同的方式下不同的诊断，这需要检验人员具有较高的检验技术、较丰富的临床知识、以及将检验结果与临床资料相结合综合分析的能力。对于初学者学生来说，确实有一定困难。如巨幼细胞性贫血、各种白血病，通过骨髓检查可作出明确性诊断，缺铁性贫血只能做出符合性诊断等。但通过反复实验、修改报告，反复讲解相应血液病的诊断要点后，学生可以基本掌握常见血液病的诊断方法。

　　2.1.8在报告文字描述中用一些口水话，写错字、涂改字

　　骨髓检验报告要求内容简明扼要，突出重点，使用书面、专业语言，而且不能有任何涂改痕迹，因此对学生报告中出现口水话、写错字、涂改字等现象，笔者要求一定要改正，要求学生反复书写、反复修改报告，直到满意为止。并将作为平时成绩，纳入学期考试总成绩。

　　3.特别讲解常用化学染色在常见血液病的诊断中的重要作用

　　常用化学染色有过氧化物酶染色（POX）、特异性酯酶染色（SE）、非特异性酯酶染色（α-NAE）及氟化钠抑制实验，铁染色等。如POX、SE和α-NAE及氟化钠抑制实验对常见急性白血病（急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病）的鉴别具有重要意义；铁染色，对缺铁性贫血诊断具有重要意义等。因此，要求学生在骨髓检验报告单中，做了化学染色的，必须填写化学染色结果。

　　4.强调血片检查在骨髓检验中的作用

　　许多血液病不仅骨髓象发生改变，而且血象也有相应改变。如常见急性白血病，不仅骨髓象可见到大量原始、幼稚白血病细胞，血片中也可查到大量一般绝对见不到的异常原始、幼稚细胞。因此，血涂片的检查和描写对血液病的诊断也很重要，学生也需要重视。

　　骨髓检验报告主要包括以下几部分的内容：骨髓象、血象、细胞化学染色结果、诊断意见及建议。笔者通过以上几个方面的反复教学，学生可在毕业前基本掌握常见血液病的骨髓检验报告书写方法，并正确下诊断，为学生将来服务社会奠定了良好基础。

生物实验报告12

　　一、实验报告的特点

　　1．实录性实验报告是实验研究工作的如实记录。内容包括整个实验的主要过程，如实验步骤、方法、实验结果等。

　　2．科学性科技实验报告既可以描述创新的内容，又可以记述重复实验的工作。另外，实验报告可以不要求具有明确的结论，只要对科学研究有参考或借鉴价值，无论结果是否达到预期要求，都可以写成科学实验报告。

　　3．目的性以如实记载实验过程与结果为目的的所有科学实验工作都可以写成科技实验报告

　　4．规范性一般的实验报告如分析报告、教学中的实（试）验报告、病理化验单等，内容比较单一，而且项目固定，并按一定的格式印成表，由实验者根据要求逐项填写；比较复杂的实验，要按一定的格式写成实验报告，其写作方法具有特定的规范性。

　　二、实验报告的种类

　　1．教学实验报告这类实验报告主要指理工科学生撰写的实验报告。重复科学技术史上前人已做过的实验，目的是为了验证某一学科定律或结论，训练学生的动手能力和表达能力。其实验步骤和方法一般是由教师自己拟定的，只不过是教学中的一个环节。这种实验报告通常印制成表格，由实验者逐项填写。它是重复前人已做过的实验，不具有学术价值。

　　三、实验报告的格式写法

　　实验报告的写作格式主要包括以下几个部分：

　　1．标题即实验或试验项目的名称。有时在项目之前加“关于”两字。如“关于xxx的实验报告”。实验报告标题要力求明确、醒目，集中映实验的内容。

　　2．摘要摘要是对报告内容不加注释和评论的简短陈述，内容具有立性、自含性，即不阅读报告的全文，就能获得必要的信息。也供文摘等二次文献采用。写摘要要注意：一般应说明实验的目的、方法、结果和最终结论等；一般不用图、表、化学结构式等；字数一般不超过200字；位于正文之前。

　　3正文

　　(1）引言。引言部分应是一系列间题的说明，如：研究的对象、实验的意义和作用；此前该项工作的发展概况以及存在的问题；本实验要达到的目标，等等。引言要使用概括性的语言叙述，较重要的地方才略作说明，而且点到为止。

　　(2）主体。

　　①实验原理。实验原理是进行科学实验的理论依据，因此，在写作时要做到细致准确。其内容主要包括：简要介绍实验涉及的主要概念、主要定律、公式等。原理部分的文字应做到简明、清晰，易懂。对于比较复杂和比较新颖的实验，或者考虑到读者并非都是专家的情况下，可以对实验所依据的理论作简要的说明。否则，原理部分可以省略

　　②实验设备和方法步骤。实验设备是实验报告中比较重要的部分。有关实验设备应说明其原理、结构、型号、性能，若有自主设计制造的设备，还要附必要的图纸和表格，另外还要叙述实验的条件和对实验的具体要求。

　　实验方法是实验能否成功的必要条件之一。在写作时要叙述得全面完整、准确无误。在说明实验装置时，一般按空间顺序来表述，说明操作程序时，般按时间顺序来表述。

　　化学实验中的试剂，应标明形态、浓度、成分等。③结果与讨论。这部分是实验报告的主体，也是读者最为关注的实质性内容，应力争写好。实验结果一般都用专业术语表述，引用的数字要真实，报告中的'图表、数字要符合规范要求。如果实验结果的记录失真，将使实验报告丧失科学价值。

　　讨论就是从理论上对实验所得结果进行分析、解释，阐明结果的必然性。通常是分条进行讨论，要求简短，这也是实验报告与实验型论文的区别所在。报告讨论的内容可包括：对实验结果进行具体分析、说明影响实验的根本因素、实验结果的适用范围及与理论结果的差别等。

　　(3）结论即对实验结果进行总结评价，同时逐条列出实验结果。应当用简练、肯定的语言表达，必要时可引用关键性数据，但不再列图表，不再提出新的事实、证据或材料。

　　4．致谢致谢是对实验中给予助的单位或个人表示感谢。

　　实验报告的构成并非千篇一律，由于实验有定性实验、定量实验、结构分析实验、析因实验、对照实验、模拟实验等类型，因此，写作时重点应有所不同。以上六项构成项目，只是实验报告的基本构成内容。

　　四、实验报告的写作要求

　　I．做好实验是前提要写好实验报告，实验前一定要熟悉实验原理、仪器设备、操作方法。在实验中，要按步骤操作，细心观察现象，正确测取数据，认真做好记录。

　　2．做好实验后的综合与分析对实验过程中的各种现象以及最后的结果都要逐一分析，通过分析，揭示出其本质的东西，这也是写好实验报告的关键。并在此分析的基础上进一步综合加工，才真正＿卜升到理性认识，使理论与实验统一起来。这一过程就是实验报告由起草到定稿的过程。

　　3．坚持客观严肃的写作态度不经重复实验不得修改数据；在处理数据时，遇到误差分析和有效数字位数的问题，应按有关要求执行。

　　4．运用准确严密的表达方式

　　(1）充分利用图表。图表比文字叙述要直观、简洁、明了。

　　(2）说明的准确性、条理性。实验报告的主要表达方式是说明，要求说明准确，言之有序。即在说明物质的性状时要定性、定量；在说明实验设备、步骤和方法时要条理分明。

生物实验报告13

　　一、实验目的：

　　1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。

　　2、了解细胞凋亡的生物学意义

　　3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法

　　二、实验原理：

　　1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的`参加即可氧化为棕色化合物。

　　2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。

　　3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。

　　三、实验步骤：

　　细胞中过氧化物酶的显示

　　1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；

　　2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；

　　3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；

　　4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。

　　5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）

　　6、清水冲洗，番红复染2min。

　　7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100×）

　　细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:

　　1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)

　　2、生理盐水轻轻漂洗细胞

　　3、95%乙醇固定5min

　　4、PBS缓冲液洗2次

　　5、吉姆萨染色液染色5min

　　6、蒸馏水轻轻洗去染液

　　7、普通光学显微镜下观察。

　　吖啶橙染色:

　　1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)

　　2、生理盐水轻轻漂洗细胞

　　3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min

　　4、PBS缓冲液洗2次每次1min

　　5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液

　　6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。

　　四、结果与分析：

　　根据随机选择的几个视野的统计，该样品的细胞凋亡率=227/506×100=44.9

　　Hela细胞凋亡过程中核染色质的形态变化（吖啶橙染色）

　　五、思考题：

　　1、细胞凋亡的调控机制

　　细胞凋亡是一个受基因调控、众多细胞膜受体和胞浆蛋白参与的细胞主动自杀过程，其触发因素多种多样，包括细胞内诱导因子和抑制因子对细胞凋亡的调控。

　　2、细胞凋亡的特征

　　凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体。

　　3、研究细胞凋亡的方法

　　定性的研究方法：常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察（普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜）

　　定量或半定量的研究方法：各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。

生物实验报告14

　　医学生物化学是一门为医学院各专业开设的主干课程，是联系基础医学与临床医学的重要学科，在医学教学中具有重要作用。医学生物化学实验是一门可以自成体系，有其丰富的理论、技术内容的课程，在医学生物化学教学中占有突出的地位，它不仅可以以生动形象的实验现象帮助学生加深掌握医学生物化学的理论知识，更重要的是让学生掌握实验中的各种技术的基本原理，掌握常规实验仪器的主要性能与操作方法，培养学生在实验过程中发现问题、思考问题、分析问题和解决问题的能力。

　　一、传统的医学生物化学实验教学的弊端

　　我们以前进行的生物化学实验，其实验内容和考核方法都有弊端。

　　1.实验内容弊端。我们以前给学生开设的实验基本上都是验证性实验，一般是理论课讲述了相关知识，接着安排这个知识点的实验课。例如，理论课讲述了蛋白质的理化性质，这次实验课的内容就为“蛋白质的沉淀凝固”。课本上的理论都是前人的实验结果，对于这样的实验学生认为缺乏挑战性，实验操作中也不主动思考。医学生物化学实验课程的验证性实验太多，不能很好地发挥学生的主观能动性，也不利于学生思维能力和创造能力的培养。

　　2.考核方法的弊端。我们以前的医学生物化学实验考核成绩主要是学生的实验报告，忽略了学生在写实验报告的过程中存在抄袭现象。有的学生实验操作能力很差，抄袭别人的实验报告也可得高分。这种考核标准导致学生不重视实验过程，只注重实验报告的书写，不利于培养学生的动手能力，不利于培养学生分析问题和解决问题的能力。

　　二、生物化学实验教学改革

　　1.构建新的实验教学内容。对实验项目进行改革。我们以前医学生物化学实验内容：生物化学实验的基本知识与基本技能、蛋白质的沉淀和凝固、双缩脲法测定蛋白质的含量、还原糖含量的测定、氨基酸纸层析、尿淀粉酶活性的测定、血清尿素氮含量的测定、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳、DNA的提取与鉴定、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用等。改革后的实验内为：蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）、氨基酸纸层析、酶促反应动力学实验、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用、葡萄糖含量的测定（葡萄糖氧化酶法）、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳、组织DNA的提取与鉴定、碱性磷酸酶提取与鉴定等。经过对实验项目的改革，去掉部分淘汰实验和部分验证性实验，增加了分子生物学实验比例，增加了综合设计性实验项目。

　　综合设计性实验，就是在实践教学中，教师提出实验的总体要求，让学生自己设计实验。学生先进行分组，实验小组的各成员经过查阅文献资料、设计实验所用试剂仪器、设计实验步骤、进行预实验、制作幻灯片、小组课堂汇报这样的程序完成整个综合设计性实验。实验成功了，学生会有极大的成就感；如果有些实验不成功，带教老师进行引导，分析失败原因，再重复实验。这样，每位学生在整个实验中一直处于主体地位，避免了个别学生不动手操作、抄袭实验报告等不良行为，从而达到培养学生的创新意识，以及学生的动手、动脑能力的目的。

　　2.自编生化实验指导教材。我们以前所使用的实验教材有的内容目前已淘汰，有的内容不适合医学生，因此，我们参考了周爱儒主编的《生物化学》，药立波主编的《医学分子生物学》，赵亚华主编的'《生物化学与分子生物学实验技术教程》，刘吉民主编的《医学生物化学与分子生物学实验教程》等，结合我校的实际情况，编写了《医学生物化学实验技术》实验讲义。对医学生物化学实验的基本实验内容进行精心的取舍，保留经典的实验内容如葡萄糖含量的测定、氨基酸纸层析、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳等外，增加了综合设计性实验如组织DNA的提取与鉴定、碱性磷酸酶的提取与鉴定实验等的比例。这样一方面学生可以掌握生物化学实验的分光技术、层析技术、电泳技术等基本实验技术，另一方面通过综合设计性实验培养学生的创新能力，提高学生的综合素质。

　　3.让学生自己准备实验。传统的生物化学实验教学注重知识传递和操作能力的培养。上实验时，老师先讲实验原理、操作步骤、可能出现的结果，准备好试剂，调试好实验仪器，学生按部就班地操作即可，完全剥夺了学生的思维空间。让学生自己准备实验，学生可以全身心地投入到整个实验的各个准备阶段，例如试剂的配制、试剂的分装、仪器的调试等，在准备的过程中会出现各种问题，学生们在老师的指导下就要去分析为什么会出现这些问题，如何去解决这些问题。学生自己准备实验可以使学生获得从书本上学不到的知识和能力，从实验中得到更多的收获。

　　4.先做后讲。我们以前的实验大多为验证性实验，一般是老师讲完后学生再做，有时为了得到明确的实验结果教师参与过多，学生对实验印象不深。为此，我们决定采用先做后讲的归纳式教学方法，这种方法更适用于综合设计性实验，让学生一边做实验，一边观察讨论，整个实验做完后，让学生总结规律，老师只做归纳性、提高式讲解。这样的教学方法可以引导学生感知知识的发生过程，体验获得真知的喜悦。

　　5.应用多媒体技术丰富实验课教学。医学生物化学这门课的知识很抽象，教师讲课难度较大。多媒体技术通过文字、图像、动画和声音等传递信息。应用多媒体技术进行医学生物化学的教学，可以生动、形象地传递较多的知识，还可以帮助师生共同突破教学中的重点和难点，极大地提高教学质量。我们以前上实验课时都采用黑板板书，操作也只做一些简单的示范。由于班级人数较多，有一些学生看不到操作示范。现在我们把多媒体技术也运用在医学生物化学实验课堂上，教师把实验原理、实验试剂、实验仪器、操作步骤等做成幻灯片，比板书看起来更清晰，把实验操作也录成视频，做实验前先看一段实验操作步骤的录像，然后再操作，避免了学生看不到操作示范，这样可提高学生实验动手能力。

　　6.开放实验室。为了提高学生的实验操作能力，我们决定进行实验室开放，便于学生进行综合设计性实验的预实验及学生参与教师科研的实验。

　　（1）带教老师给学生讲解一些常用实验仪器的使用方法及注意事项，例如：电子天平、台式低速离心机、超低温离心机、恒温培养箱、水浴箱、电泳仪、烤箱、手提式不锈钢消毒器、分光光度计、PCR仪等。由实验技术人员管理、维护实验室及其仪器。

　　（2）实验室开放时间：周一到周五从18∶00～22∶00，周六、周日全天开放。带教老师和实验技术人员轮流值班，随时解决学生实验过程中的问题。

生物实验报告15

　　考点提示：

　　(1)鸡血能用猪血代替吗?为什么?不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA.

　　(2)鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?

　　防止血液凝固;因为上清液是血浆，不含细胞和DNA.

　　(3)胀破细胞的方法?能用生理盐水吗?

　　向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破;不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。

　　(4)该实验中应用玻璃烧杯还是塑料烧杯?为什么?用塑料烧杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA.

　　(5)前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少?为什么?

　　第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。

　　(6)若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么?第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布。

　　(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?

　　第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。

　　(8)实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌?防止DNA分子受到损伤。

　　(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?

　　第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出;第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。

　　(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?

　　第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L(或2mol/L)的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的`溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0.015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。

　　(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?

　　其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。

　　实验九探究酵母菌的呼吸方式

　　1、原理：酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸，产生二氧化碳和水：

　　C6H12O6+6O2+6H2O6→CO2+12H2O+能量

　　在无氧条件下进行无氧呼吸，产生酒精和少量二氧化碳：

　　C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+少量能量

　　2、装置：(见课本)

　　3、检测：(1)检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

　　(2)检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。

　　高一生物易错知识点

　　1.使能量持续高效的流向对人类最有意义的部分