分析化学：紫外-可见分光光度法

生色团（发色团）：能吸收紫外-可见光的集团。

助色团：本身无紫外吸收，但可使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的集团。

红移和蓝移：由于化合物结构变化，或溶剂效应等引起的吸收峰向短波方向移动的现象称蓝移，向长波方向移动的现象称红移。

浓色效应和淡色效应：由于化合物结构改变或其它原因，使吸收强度增加的效应称为浓色效应，反之为淡色效应。

吸收带：R带、K带、B带、E带。

Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律：A＝－lgT＝ElC

其物理意义：当一束平行光通过均匀的吸光物质时，吸光度与吸光物质的浓度和厚度成正比关系。

Lambert-Beer定律的适用条件：入射光为单色光，溶液是稀溶液。该定律适用于固体、液体、气体样品。

E为吸光系数，是吸光物质在单位浓度己单位厚度时的吸光度，在给定单色光、溶剂和温度条件下，吸光系数是物质的特征常数，表明物质对某一特定波长的吸收能力。

吸光系数可作为吸光物质定性分析的依据，和分析灵敏度的估量。

偏离Beer定律的因素：主要有化学因素和光学因素。

化学因素：通常只有稀溶液时，Beer定律才能成立。

光学因素：1.非单色光2.杂散光3.散射光和反射光4.非平行光。

透光率测量误差：△T来自仪器的噪声。T在20%～65%或A值在0.2～0.7之间，浓度测量的相对误差较小，是测量的适宜范围。

测定波长的选择：原则“吸收最大，干扰最小”，测量入射光波长为最大吸收波长。

显色反应要求：被测物质和生成的有色物质之间必须有确定的计量关系；反应产物必须有较高的吸光能力和足够的稳定性；反应产物的颜色与显色剂颜色必须有明显的差别；显色反应必须有较好的选择性。

显色剂的选择：显色剂用量，溶液酸度，显色时间，温度，酸度。

干扰的消除：控制酸度，选择适当的隐蔽剂，选择适当的测量波长，选择适当的空白溶液（溶剂空白，试剂空白，试样空白），分离。

紫外-可见分光光度计的主要部件

1.光源：基本要求是在仪器操作所需的光谱区能发射强度足够且稳定的连续光源。钨灯或卤钨灯，氢灯或氘灯。

2.单色器：包括狭缝、准直镜、色散光件。

色散光件：棱镜、光栅。

3.吸收池：要求匹配性。玻璃/石英。

4.检测器：将光信号转变为电信号的装置。光电池、光电管、光电倍增管、二极管阵列检测器。

5.信号处理和显示系统。

分光光度计的类型

1.单光束分光光度计

2.双光束分光光度计

3.双波长分光光度计

4.全波长分光光度计

定性分析：主要依据是多数有机化合物具有特征吸收光谱，如吸收光谱的形状、吸收峰的数目、各吸收峰的波长位置和相应的吸光系数等。常采用比较法。

比较吸收光谱，比较吸收光谱特殊数据，比较吸光度比值。

单组分的定量方法：标准曲线法，标准对照法，吸光系数法。

标准曲线法注意的问题：制备一条标准曲线至少需要5～7个点，并不得随意延长；待测液浓度应包括在标准曲线浓度范围内，不然则应进行适当的稀释或浓缩，或改变吸收池厚度；待测液和对照品溶液必须在相同条件下进行测定。

多组分样品的定量方法：若各组分的吸收峰互不重叠，可按照单组分样品的测量方法；两组分的吸收光谱有部分重叠；若各组分的吸收光谱相互重叠，则有解线性方程组法、双波长分光光度法（等吸收点法、系数倍率法）。

紫外-可见吸收光谱与分子结构的关系：饱和化合物的，不饱和化合物的。

影响紫外吸收光谱的因素：位阻影响，跨环效应，溶剂效应，体系PH值的影响。

结构分析